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关于液相色谱仪色谱柱使用及维护
发布时间:2015-07-24   点击次数:2337次
液相色谱仪色谱柱使用及维护

使用卡套柱时,两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗,任何时候都不能将卡套取下来,否则会造成填料的流失。 
     
     卡套柱的安装(加预柱)
     1.将卡套架套入柱芯
     2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套高于柱芯(见下图)
     3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片
     4.将"子弹头"预柱放入卡套片内
     5.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手拧紧
     6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端
       平衡色谱柱 
      反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。
       硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡
       如何平衡色谱柱? 
       平衡过程中,将流速缓慢地提高
       用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)
       色谱柱的再生   进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议不使用您的液相色谱仪上的泵。 
        表1 建议用来冲洗的溶剂体积
        注意:
        
     在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液*流出。 
     
        **如果简单的有机溶剂/水的处理不能够*洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
        色谱柱的维护 
        1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)
        2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围
        3.避免流动相组成及极性的剧烈变化
        4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
        5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中
        6.压力升高是需要更换预柱的信号
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